1、 適用范圍:
適用于各種食品、原料及純水樣品中含有大腸菌群的快速測(cè)定。

2、 方法原理:
將乳糖、顯影劑和選擇性培養(yǎng)基分別裝入一張紙上。經(jīng)過(guò)培養(yǎng)，可以在紙上生長(zhǎng)并發(fā)酵乳糖產(chǎn)生酸的細(xì)菌被認(rèn)為是大腸菌群陽(yáng)性。稀釋度大腸菌群陽(yáng)性紙片數(shù)，根據(jù)大腸菌群MPN表找出相應(yīng)的大腸菌群數(shù)。

3、方法特點(diǎn):
與國(guó)標(biāo)法中的九管法相對(duì)應(yīng)，實(shí)驗(yàn)的最初步驟簡(jiǎn)化為一步,和從78 h時(shí)間縮短到不到24 h,不再需要大量的輔助設(shè)施如培養(yǎng)基的制備、消毒和清潔文化的血管。工作時(shí)，可以隨時(shí)打開(kāi)包裝進(jìn)行取樣和測(cè)試。

4、操作方法
(1)樣品處理:無(wú)菌重25克(或25毫升)的樣本采樣瓶或均化杯含有225毫升無(wú)菌生理鹽水,徹底擺脫1:10樣品勻漿,并使用1毫升,消除細(xì)菌吸管1:10樣品勻漿,將它注入試管中包含9毫升無(wú)菌生理鹽水,搖動(dòng)試管，稀釋1:100。通過(guò)類(lèi)推，每次稀釋都要更換一根無(wú)菌吸管。
(2)接種:選擇兩種稀釋液接種。普通食品一般用1:10和1:10的兩種稀釋劑，而飲料和飲用水則用1:10的兩種稀釋劑。每一部分由三張大紙(連接到10mL)和六張小紙(連接到1mL)組成。每張大紙與每袋兩張紙疊放時(shí)視為一張紙。用無(wú)菌移液管抽取1:10稀釋的10ml，放入裝有一張大紙(相當(dāng)于1g樣品)的塑料袋中，吸收后平放，重復(fù)三次。然后用1mL無(wú)菌移液管抽1mL同樣的稀釋液，涂于裝有一張0.1g樣品的小紙片的塑料袋上，重復(fù)三次。另取1ml無(wú)菌移液管，抽取1ml 1:100稀釋液，置于裝有小紙片(相當(dāng)于0.01g樣品)的塑料袋中，重復(fù)三次。
(3)培養(yǎng):將接種紙(可堆疊)置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)15h-24h。

5. 結(jié)果判斷和計(jì)數(shù):

如果紙張變黃或黃色背景上出現(xiàn)紅點(diǎn)，則為大腸菌群陽(yáng)性。紙張保持相同的紫藍(lán)色或在紫藍(lán)色的背景上出現(xiàn)紅點(diǎn)，但沒(méi)有黃色的周?chē)募垙埵顷幮缘拇竽c菌群。

記錄每種稀釋液中陽(yáng)性大腸菌群數(shù)量，根據(jù)大腸菌群MPN表找出相應(yīng)的大腸菌群數(shù)量。如果接種液的第一次稀釋是原溶液，在桌面上找到的結(jié)果應(yīng)除以10，以此類(lèi)推。

6. 注意事項(xiàng):

當(dāng)樣品的pH值低于pH 7時(shí)，應(yīng)先用1mol/L無(wú)菌氫氧化鈉(NaOH)將溶液調(diào)至中性，以免pH值引起紙張泛黃，影響觀察結(jié)果。